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技術文章
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技術文章
2019-916
轉染是將外源性基因導入細胞內(nèi)的一種專門技術。分為物理介導方法：電穿孔法、顯微注射和基因槍；化學介導方法：如經(jīng)典的磷酸鈣共沉淀法、脂質(zhì)體轉染方法、和多種陽離子物質(zhì)介導的技術；生物介導方法：有較為原始的原生質(zhì)體轉染，和現(xiàn)在比較多見的各種病毒介導的轉染技術。理想細胞轉染方法，應該具有轉染效率高、細胞毒性小等優(yōu)點。病毒介導的轉染技術，是目前轉染效率快的方法，同時具有細胞毒性很低的優(yōu)勢。但是病毒轉染方法的準備程序復雜，常常對細胞類型有很強的選擇性，在一般實驗室中很難普及。其它物理和化學...
查看更多2019-912
如何傳代貼壁細胞？細胞在培養(yǎng)瓶長成致密單層后，已基本上飽和，為使細胞能繼續(xù)生長，同時也將細胞數(shù)量擴大，就必須進行傳代（再培養(yǎng)）。傳代培養(yǎng)也是一種將細胞種保存下去的方法。同時也是利用培養(yǎng)細胞進行各種實驗的必經(jīng)過程。懸浮型細胞直接分瓶就可以，而貼壁細胞需經(jīng)消化后才能分瓶。一般使用蛋白水解酶（比如胰蛋白酶）消化貼壁細胞成單個細胞，也可加入乙二胺四乙酸（EDTA）提高消化能力，EDTA是一種二價離子的螯合劑，能抑制細胞膜上的Ca2+和Mg2+。常用的細胞消化液一般含有0.25%(w/...
查看更多2019-910
凡是來源于胚胎、組織器官及外周血，經(jīng)特殊分離方法制備而來的原初培養(yǎng)的細胞稱之為原代細胞。原代細胞的培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)是從供體取得組織細胞在體外進行的培養(yǎng)，是建立細胞系的DI一步，是一項基本技術。原代細胞接近和能反映體內(nèi)生長特性，適宜用于藥物敏感性試驗、細胞分化等實驗研究。方法1.組織塊培養(yǎng)法組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶（或皿）中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。2.消...
查看更多2019-99
關于血清使用的幾點建議1、血清必須貯存-20℃，如存放于4℃，請勿超過兩周，對于某些單位一次無法用完一瓶，可在無菌條件下將其40-45ml分裝于無菌50ml離心管中（或血清瓶中），由于血清解凍時體積會增加10％，必須預留此膨脹體積的空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂的情形。2、一般公司所提供的血清一般為200ml和500ml裝量，因此建議在使用中宜采取逐步解凍的方法解凍血清：-20℃→4℃冰箱或冷庫溶解24小時→室溫下全溶后再分裝，一般以50ml無菌離心管中分裝40-45ml。使...
查看更多2019-93
增加你的科研文章影響力的八招看到中國的論文數(shù)已經(jīng)，但引用量仍舊不盡人意。怎樣提高文章的引用量越來越引起人們的重視，因為引用量從一個角度反映出文章影響科學同行的程度，雖然正負影響都有可能。我不是大牛，自己文章的引用率也不算高。這里我談談自己淺薄的想法和體會，希望能拋磚引玉，共同促進我國科學的發(fā)展和影響力。1.酒香不怕巷深，好文不怕沒人看。很明顯，重要的是文章的質(zhì)量。很多諾貝爾獎級的文章并不是發(fā)表在《Nature》或《Science》上的。好文章發(fā)表在二流雜志上剛開始沒人注意，但...
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