EMT6小鼠乳腺癌細胞

（1）請客戶收到細胞株產(chǎn)品后，立即對外包裝，細胞凍存管，細胞培養(yǎng)瓶等拍照，如有疑問或問題，須在24小時內(nèi)通知上海信裕生物科技有限公司，提供照片和書面說明

（2.）請客戶在收到復蘇細胞后，迅速將原裝的細胞瓶放入細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置，3-4小時后，再使用傳代（注：請客戶觀看細胞狀態(tài)后。如若細胞已經(jīng)長滿且貼壁好，也可靜止4小時左右后就傳代

（3.）請使用新配制的培養(yǎng)體系

（4.）請客戶培養(yǎng)細胞前三天，須對細胞生長狀態(tài)進行拍照和注明時間，若細胞生長存在質(zhì)量問題，須向上海本公司提供培養(yǎng)生長的照片和書面說明。

（5.）請客戶仔細閱讀細胞說明書，提前準備好相應的培養(yǎng)體系，避免造成細胞質(zhì)量問題

EMT6小鼠乳腺癌細胞

注：（1），觀察細胞在低倍鏡（4或5X物鏡）下進行，否則不能準確判斷細胞的傳代密度?？醇毎男螒B(tài)請在10X或20X物鏡下。

(2)，瓶中運輸培養(yǎng)基不能重復再用，請換用加雙抗或無雙抗的新培養(yǎng)基，細胞凍存后，培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。

(3)，有些細胞貼壁不牢，如發(fā)現(xiàn)貼壁細胞脫落，可離心吹打后接種到新瓶內(nèi)。

常見問題及解決方案

1、培養(yǎng)瓶有破裂，培養(yǎng)液有漏液：極大可能會污染，所以我們會及時安排幫老師解決。  2、細胞漂浮：培養(yǎng)瓶不開封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察，如細胞大部分又貼回瓶底，表明細胞活力正常，剩余漂浮的細胞可以去掉，留 10ml 培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察，細胞生長至匯合度 80%，進行消化傳代；如細胞還是不貼壁，將細胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶，原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，中間注意觀察，我們的技術(shù)人員會一直跟蹤指導，直到問題解決。

選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞，有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實驗目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。
瓶裝血清一定要逐步解凍: 4℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻小心勿造成氣泡，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃ 解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。
熱滅活是指56℃，30分鐘加熱已*解凍之血清。水浴鍋升到56℃后，將血清放入，待溫度升高到56℃后計時，一般5分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因為會造成沉淀物之顯著增多，且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清包括不同批次對細胞的影響?！炯毎s寫】"    EMT-6細胞
【背景資料】    見細胞說明書
【細胞來源】    細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國內(nèi)外著名大學建系
【代次】    P4
【規(guī)格】    復蘇T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存1ml凍存管（兩支）
"細胞凍存及復蘇基本知識普及：
細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來，這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種，起到了細胞保種的作用。
除此之外，還可以利用細胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運送某些細胞。細胞凍存時向培養(yǎng)基中加入保護劑--終濃度5%.15%的甘油或二甲基亞砜DMSO，可使溶液冰點降低，加之在緩慢凍結(jié)條件下，細胞內(nèi)水分透出，減少了冰晶形成，從而避免細胞損傷。 
采用""慢凍快融""的方法能較好地保證細胞存活。標準冷凍速度開始為-1 到 -2℃/min，當溫度低于-25℃時可加速，到-80℃之后可直接投入液氮內(nèi)-196℃?！炯毎麛?shù)】"    1*10（6）
【生物安全級別】    1
【生物體】    小鼠
【組織來源】    乳腺
【細胞形態(tài)】    上皮細胞樣
【細胞特性】    貼壁
【細胞活力】    95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）
【細胞檢測】    細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌